পাইথন 3.0 ডিসেম্বর 2008 এ প্রকাশিত হয়েছিল। এটি পূর্ববর্তী সংস্করণে কিছু ত্রুটি সংশোধন করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছিল। পাইথন 3 এর গাইডিং নীতি ছিল:"পুরনো কাজ করার উপায়গুলি সরিয়ে বৈশিষ্ট্যের অনুলিপি হ্রাস করুন"। Python 3.0 পশ্চাদগামী সামঞ্জস্য প্রদান করে না। তার মানে 2.x সিনট্যাক্স সংস্করণ ব্যবহার করে লেখা একটি পাইথন প্রোগ্রাম python 3.x ইন্টারপ্রেটারের অধীনে কার্যকর হয় না। Ver 2.7 হল Python 2.x সিরিজের চূড়ান্ত প্রধান রিলিজ।
যদিও এই দুটি সংস্করণের ব্যবহারে বেশ কিছু পার্থক্য রয়েছে, তবে সবচেয়ে সুস্পষ্টগুলি নীচে উল্লেখ করা হয়েছে -
মুদ্রণ Python 2.7-এর একটি কীওয়ার্ড কিন্তু Python 3.x-এ অন্তর্নির্মিত ফাংশন হিসেবে অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছে। ফলস্বরূপ Python 3 কোডে এটি ব্যবহার করার সময় বন্ধনী বাধ্যতামূলক৷
print “Hello World” # is acceptable in Python 2 but not in Python 3 print (“Hello World”) #acceptable in Python 2 and Python 3
raw_input() − Python 2.7 থেকে ফাংশনটি বাতিল করা হয়েছে। ইনপুট() ফাংশন প্রাপ্ত ডেটাকে শুধুমাত্র স্ট্রিং হিসাবে বিবেচনা করে।
পূর্ণসংখ্যা বিভাগ − Python 3-এ কার্যকারিতা পরিবর্তন করা হয়েছে। Python 2.x-এ, 5/2 ফলাফল 2, কিন্তু Python 3.x-এ, 5/2 হল 2.5
ইউনিকোড − Python 3.x-এ একটি স্ট্রিং ডিফল্টরূপে ইউনিকোড। Python 2.x-এ, স্ট্রিংকে স্পষ্টভাবে ইউনিকোড হিসাবে সংজ্ঞায়িত করতে হবে এটিকে 'u' (যেমন u'hello') দিয়ে প্রিফিক্স করে
দীর্ঘ পূর্ণসংখ্যা − Python 3.x-এ, পূর্ণসংখ্যা বস্তুগুলি ডিফল্টরূপে দীর্ঘ হয়। Python 2.x-এ, একটি পূর্ণসংখ্যাকে L দ্বারা পোস্টফিক্স করতে হবে (যেমন 100L)